(1)將旋光儀接于220V交流電源。開啟電源開關，約5分鐘后鈉光燈發光正常，就可開始工作。
(2)檢查旋光儀零位是否準確，即在旋光儀未放試管或放進充滿蒸餾水的試管時，觀察零度時視場亮度是否一致。如不一致，說明有零位誤差，應在測量讀數中減去或加上該偏差值。或放松度盤蓋背面四只螺釘，微微轉動度盤蓋校正之（只能校正0.5°左右的誤差，嚴重的應送制造廠檢修）。
(3)選取長度適宜的試管，注滿待測試液，裝上橡皮圈，旋上螺帽，直至不漏水為止。螺帽不宜旋得太緊，否則護片玻璃會引起應力，影響讀數正確性。然后將試管兩頭殘余溶液揩干，以免影響觀察清晰度及測定精度。
(4)測定旋光讀數：轉動度盤、檢偏鏡、在視場中覓得亮度一致的位置，再從度盤上讀數。讀數是正的為右旋物質，讀數是負的為左旋物質。
(5)PolAAr3005旋光儀采用雙游標讀數法可按下列公式求得結果：
Q=A+B/2
式中：A和B分別為兩游標窗讀數值。如果A=B，而且度盤轉到任意位置都符合等式，則說明旋光儀沒有偏心差（一般出廠前旋光儀均作過校正），可以不用對項讀數法。
(6)旋光度和溫度也有關系。對大多數物質，用λ=5893A°（鈉光）測定，當溫度升高1℃時，旋光度約減少0.3%。對于要求較高的測定工作，最好能在20℃±2℃的條件下進行。
旋光儀的維護
(1)旋光儀應放在通風干燥和溫度適宜的地方，以免受潮發霉。
(2)旋光儀連續使用時間不宜超過4小時。如果使用時間較長，中間應關熄10～15分鐘，待鈉光燈冷卻后再繼續使用，或用電風扇吹打，減少燈管受熱程度，以免亮度下降和壽命降低。
(3)試管用后要及時將溶液倒出，用蒸餾水洗滌干凈，揩干藏好。所有鏡片均不能用手直接揩擦，應用柔軟絨布揩擦。
(4)PolAAr3005旋光儀停用時，應將塑料套套上。裝箱時，應按固定位置放入箱內并壓緊之。
